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abstract
In-situ-PCR und PCR-in-situ-Hybridisierung sind neue molekularbiologische Methoden fuer Forschung und Diagnostik , die die Empfindlichkeit einer Polymerasekettenreaktion mit dem Vorteil der In-situ-Hybridisierung verbinden , gesuchte DNS-Abschnitte spezifisch einzelnen Zellen zuzuordnen . Zusaetzlich kann durch optische Kontrolle des Reaktionsproduktes die Gefahr falsch-positiver Resultate durch Kontamination mit Fremd-DNS minimiert werden . In den letzten Jahren wurde eine Vielzahl von Anwendungsprotokollen beschrieben , die es erlauben , spezifische DNA- und RNA-Sequenzen mit Hilfe dieser Methode in einfacher Weise darzustellen . Grundsaetzlich werden 2 verschiedene Methoden des DNS-Nachweises verwendet , die indirekte PCR-in-situ-Hybridisierung ( PCRisHyb ) und die direkte In-situ-PCR ( isPCR ) . Anhand eines Fallbeispiels wird eine schnelle und reproduzierbare Methode fuer die PCRisHyb bzw. die isPCR an formalinfixiertem Paraffinmaterial vorgestellt und beide Techniken verglichen . Bei beiden durchgefuehrten Methoden ( isPCR und PCRisHyb ) zeigt sich eine gut sichtbare Darstellung des Amplifikationsproduktes bei optimal erhaltener Gewebsmorphologie . Der Vorteil der indirekten PCRisHyb liegt in der hoeheren Spezifitaet , waehrend die direkte isPCR schneller einfacher und kostenguenstiger , durchzufuehren ist .
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