DerUnfallchirurg.71000354.ger.abstr-passage-0
abstract
Wachstumsfaktoren sind fuer jeden Wundheilungsprozess von essentieller Bedeutung . Experimentelle Untersuchungen haben gezeigt , dass die lokale Anwendung dieser Substanzen den natuerlichen Heilungsprozess bei ligamentaeren Verletzungen beschleunigen kann . Die Methoden fuer eine effiziente klinische Anwendung sind jedoch nicht ausreichend entwickelt , um eine dauerhaft hohe Konzentration an der Verletzungsstelle zu erzielen . Eine moegliche Loesung fuer dieses Problem ist die Synthese von Wachstumsfaktoren durch ortsstaendige Zellen im Kniegelenk , die hierzu durch lokalen Gentransfer angeregt werden koennten . In einem neuen experimentellen Ansatz untersuchen wir die Moeglichkeit des lokalen Gentransfers in die Patellarsehne mit dem Ziel , ortsstaendige Zellen zur Produktion von Wachstumsfaktoren anzuregen . In einer experimentellen Studie wurden zunaechst verschiedene Vektoren untersucht , die fuer den Gentransfer in Fibroblasten in Frage kommen . Virale Vektoren bieten neben non-viralen Vektoren , wie z . B. Liposomen , die Moeglichkeit , das Genom von Zellen zu modifizieren . Hierzu wurden Zellkulturen aus dem VKB und HKB des Kaninchens angelegt . Diesen Zellkulturen wurden dann verschiedene Vektoren zugesetzt , die ein Markergen transportieren . Transduzierte Zellen sezernierten anschliessend die histochemisch nachweisbare Substanz -Galaktosidase . Die quantitative Expression dieser Substanz wurde bestimmt . Bei diesen In-vitro-Vorversuchen zeigte sich , dass Adenoviren saemtliche Wirtszellen transduzierten , wobei die Expression der Markersubstanz zeitlich begrenzt war . Retroviren hatten einen signifikant geringeren Effekt , der sich jedoch ebenso wie bei adenoassoziierten Viren durch weitere Selektionsschritte steigern liess . Liposome zeigten generell die geringste Wirkung . In einem In-vivo-Versuch wurden Adenoviren in die Patellarsehnen von Kaninchen injiziert . Transduzierte Zellen wurden vorwiegend in der synovialen Schicht beobachtet . Die Expression liess waehrend des 6-woechigen Untersuchungszeitraums nach . In einem Ex-vivo-Versuch wurden Fibroblasten zunaechst mit Retroviren in vitro transduziert , anschliessend selektiert und in die Patellarsehne injiziert . Dieses Verfahren resultierte in einer zahlenmaessig groesseren Expression . Im Gegensatz zu der In-situ-Transduktion mit Adenoviren konnten transduzierte Zellen entfernt von der Injektionsstelle nachgewiesen werden , wo sich diese Zellen in das Crimp-Muster der Patellarsehne integrierten .
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