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abstract
Wir untersuchten die Wertigkeit der Polymerase-Kettenreaktion ( PCR ) fuer die Diagnostik der tuberkuloesen Meningitis ( TBM ) . Hierzu wurden Liquorproben von 49 Patienten mit Verdacht auf TBM mit Hilfe eines fuer mykobakterielle DNA spezifischen Halb-nested-PCR-Protokolls gescreent . Die Evaluierung der Methode erfolgte durch Vergleich der PCR-Ergebnisse mit den Resultaten angelegter Liquorkulturen , histopathologischen Daten sowie den klinischen Verlaeufen . Mit Hilfe der getesteten PCR-Methode konnte im Liquor von 4 der insgesamt 5 Patienten mit gesicherter TBM mykobakterielle DNA detektiert werden , entsprechend einer 80%igen Sensitivitaet des getesteten Protokolls . In 25% der Proben von Individuen ohne TBM blieb der PCR-Nachweis ebenfalls positiv . Die Sequenzanalyse der Mehrzahl der PCR- Produkte ermittelte die Amplifikation von Mycobacterium fortuitum ( M. fortuitum ) . Zur Optimierung der Spezifitaet der PCR , wurden die bisher verwendeten PCR-Primer , die eine Reihe von mykobakteriellen Subtypen erkennen , durch eine Primerkombination ersetzt , welche hochspezifisch nur das Genom von Mycobacterium tuberculosis ( M. tuberculosis ) amplifiziert . Das Screening der Patientenproben mit Hilfe des geaenderten Protokolls fuehrte zu einer deutlich erhoehten Spezifitaet der TBM-Diagnostik mittels PCR ( 97% ) bei gleicher Sensitivitaet ( 80% ) . Die Ergebnisse dieser Studie weisen darauf hin , dass M. fortuitum , als ein ubiquitaerer Keim mit geringer Pathogenitaet , Untersuchungsproben verunreinigen kann und die Verwendung von Primerpaaren , die gruppenspezifische mykobakterielle DNA erkennen , zu falsch-positiven Resultaten fuehren kann . Fuer die Validitaet der PCR ist daher neben der Sensitivitaet der Nachweisreaktion , die Spezifitaet der eingesetzten PCR-Primer von grosser Bedeutung , um zwischen mykobakteriellen Subtypen zu differenzieren .
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