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abstract
Einleitung : Interleukin-1 ist ein wichtiger Faktor in der Pathophysiologie der Osteoporose und moeglicherweise der periartikulaeren Knochenresorption bei rheumatoider Arthritis . Die Nutzung von therapeutischen Proteinen , wie Zytokinen und Wachstumsfaktoren als neue therapeutische Modalitaet beinhaltet ein grosses medikamentoeses Potential . Die konventionelle Applikation rekombinanter Proteine ist jedoch fuer eine klinischen Anwendung aufgrund kurzer Halbwertzeiten ungeeignet . Fragestellung : Es sollte erstens untersucht werden , ob humane osteoblastaere Zellen in vitro retroviral transduziert werden koennen . Zweitens wurde getestet , ob sich die retrovirale Transduktionsrate in vitro optimieren laesst . Methode : Die untersuchten Zellpopulationen wurden aus humanen Spongiosaproben isoliert und in vitro kultiviert . Das -Galactosidase-Gen ( LacZ ) und die cDNA des humanen Interleukin-I-rezeptorantagonistischen Proteins ( IL-1Ra) wurden durch retroviral vermittelten Gentransfer auf die Zellkulturen uebertragen . Die LacZ Aktivitaet wurde durch Xgal-Faerbung bestimmt , IL-1Ra wurde mittels ELISA quantitativ gemessen . Ergebnisse : Die IL-1Ra-Expression erreichte Werte von 8614pg IRAP/50000 Zellen/48h bis 10089pg IRAP/50000 Zellen/48h. Unter Optimierung der Transduktionstechnik liess sich bei der X-gal-Faerbung nach retroviralem Transfer des LacZ Gens eine Transduktionsrate von 60% nachweisen . Schlussfolgerungen : Unsere Ergebnisse demonstrieren , dass eine retrovirale Transduktion von humanen osteoblastaeren Zellen in vitro moeglich ist und zu einer reproduzierbaren Produktion der transgenen Produkte fuehrt .
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