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abstract
S-Antigen ( AgS ) und Interphotorezeptor-retinoid-bindendes Protein ( IRBP ) sind 2 hochpotente uveitopathogene Autoantigene der Retina , die im Tierexperiment haeufig zum Triggern einer Autoimmunuveitis ( EAU ) eingesetzt werden . Ziel der Untersuchungen war die simultane Isolierung beider Proteine aus boviner Retina unter Vermeidung zeitaufwendiger Dialyse und Verwendung kleiner kommerziell verfuegbarer Fertigsaeulen . , Methode : Retinaextrakt wurde nach bekanntem Modus isoliert und mit Ammoniumsulfat gefaellt . Entsalzung und Umpufferung des geloesten Praezipitats wurden an einer Bio-Gel P6-Saeule durchgefuehrt . Die anschliessende Fraktionierung an Econo-Pac Q lieferte eine AgS- und IRBP-Rohfraktion , deren weitere Reinigung vorwiegend an 5-ml-Econo-Pac Q , -HTP- und -HIC-Kartuschen erfolgte . Ergebnisse : AgS und IRBP wurden in hoher Reinheit ( Natriumdodecylsulfat-Polyacrylamidgelelektrophorese Silberfaerbung ) , aus boviner Retina unter Verwendung kleiner Fertigsaeulen und mit Ausbeuten von etwa 0,25 ( AgS ) bzw. 0,15 ( IRBP ) mg/g Retina isoliert . Schlussfolgerung : Fertigkartuschen ermoeglichen die simultane Isolierung von AgS und IRBP in mg-Mengen unter methodisch vereinfachten Bedingungen . Dieses Vorgehen koennte insbesondere bei begrenzter Retinamenge interessant sein .
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